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As principais técnicas da engenharia genética começaram a ser a ser definidas no início do ano de 1970, primeiro com utilização de vectores de clonagem (plasmideos e genomas virais), depois com a utilização das enzimas de restrição que permitiu cortar o ADN em pontos específicos , isolando-se os fragmentos para introduzir no genoma de moléculas de DNA idênticas.
As técnicas fundamentais
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As técnicas fundamentais pertencentes ao domínio da Engenharia Genética são: a técnica do DNA recombinante (DNAr), a técnica do DNA complementar (DNAc), que se inclui na técnica do DNA recombinante, a técnica da Reacção de Polimerização em Cadeia (PCR) e a tecnologia das Impressões Digitais Genéticas
DNA recombinante
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O processo baseia-se em dois tipos de enzimas, as enzimas de restrição e a enzima DNA ligase. Utiliza-se uma enzima de restrição, que tem a capacidade de seleccionar zonas especificas do DNA e cortar a sequencia nucleotídica nesses locais específicos, para obter o gene de interesse de uma espécie. Esse gene de interesse é posteriormente colocado num vector, ou seja, uma molécula capaz de transportar um fragmento de DNA de um organismo para outro, como são exemplos, o DNA dos virus e os Plasmídeos (fragmentos de DNA de forma circular existentes nas bactérias). Para que o fragmento de DNA seja incorporado no vector, é necessário que a mesma enzima de restrição que actua sobre o DNA actue sobre o vector, de modo a criar uma sequencia nucleotídica complementar. Finalmente, através da enzima DNA ligase, os dois segmentos de DNA são ligados, produzindo uma nova molécula estável – o DNA recombinante.
DNA complementar
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O DNA complementar baseia-se na produção de uma molécula de DNA constituída apenas por exões de modo a que quando for transcrita pelo microrganismo pretendido, origine a proteína pretendida.
Este processo é possível devido á acção da enzima transcriptase reversa, que permite produzir DNA a partir de uma molécula de mRNA, e da enzima DNA polimerase, que permite fazer uma cadeia complementar de uma cadeia de DNA. Utiliza-se então a transcriptase reversa para fazer uma cópia de uma cadeia de mRNA maturado e originar uma cadeia de DNA composta apenas por exões.
Posteriormente usa-se a DNA polimerase para formar um cadeia complementar dessa cadeia de DNA, originando uma molécula estável. Com isto, ao ser introduzida num microrganismo, vai produzir uma proteína de interesse.
Este processo é possível devido á acção da enzima transcriptase reversa, que permite produzir DNA a partir de uma molécula de mRNA, e da enzima DNA polimerase, que permite fazer uma cadeia complementar de uma cadeia de DNA. Utiliza-se então a transcriptase reversa para fazer uma cópia de uma cadeia de mRNA maturado e originar uma cadeia de DNA composta apenas por exões.
Posteriormente usa-se a DNA polimerase para formar um cadeia complementar dessa cadeia de DNA, originando uma molécula estável. Com isto, ao ser introduzida num microrganismo, vai produzir uma proteína de interesse.
Clonagem
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Consiste produção de indivíduos geneticamente iguais ou seja duplicar o património genético de qualquer organismo.
A clonagem é uma das principais técnicas utilizadas pelos cientistas .
Maior parte das investigações não seriam possíveis se não fosse a clonagem, o material para analise sem o uso da clonagem seria insuficiente.
A clonagem é uma das principais técnicas utilizadas pelos cientistas .
Maior parte das investigações não seriam possíveis se não fosse a clonagem, o material para analise sem o uso da clonagem seria insuficiente.
Reacção de Polimerizaçãoem Cadeia .
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Técnica utilizada pelos cientistas, para amplificarem uma determinada porção de DNA. Para isso:
1.aquecem o DNA para separar as duas cadeias;
2.adicionam os nucleótidos e a enzima DNA polimerase para que a dupla hélice se reponha a partir de cada uma das cadeias simples;
3.repetem o procedimento ate obterem copias suficientes para o DNA em estudo
1.aquecem o DNA para separar as duas cadeias;
2.adicionam os nucleótidos e a enzima DNA polimerase para que a dupla hélice se reponha a partir de cada uma das cadeias simples;
3.repetem o procedimento ate obterem copias suficientes para o DNA em estudo
Nota
Gene é a unidade fundamental da hereditariedade
DNA é um composto orgânico cujas moléculas contêm as instruções genéticas que coordenam o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos e alguns vírus.
Enzimas são moléculas que actuam como catalisadores nas reacções químicas dos seres vivos.
DNA é um composto orgânico cujas moléculas contêm as instruções genéticas que coordenam o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos e alguns vírus.
Enzimas são moléculas que actuam como catalisadores nas reacções químicas dos seres vivos.
link
http://www.youtube.com/watch?v=MIDfKM7tJi4&playnext=1&list=PLB001F58AFE1C90C4
http://www.youtube.com/watch?v=gcDjJ-27g2w&feature=related
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